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毛栓菌漆酶基因克隆及其酵母表达载体的构建

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【作者】 闵凯宋瑞清邓勋

【Author】 MIN Kai et al(School of Forestry,Northeast Forestry University,Harbin,Heilongjiang 150040)

【机构】 东北林业大学林学院黑龙江省森林保护研究所

【摘要】 [目的]研究毛栓菌漆酶基因克隆及其酵母表达载体的构建,为研制高品质酶制剂,实现其工业化生产和规模化应用奠定了基础。[方法]以毛栓菌总RNA为模板,通过RT-PCR克隆去信号肽的漆酶基因;通过BLAST比对,对毛栓菌漆酶基因序列的同源性进行分析;对质粒pPIC9K进行EcoRⅠ和NotⅠ进行酶切,构建其酵母表达载体p9K+Lac。[结果]去信号肽的漆酶基因编码框全长为1 512bp,编码506个氨基酸,分子量为54 KDa;毛栓菌漆酶基因与NCBI中提交的毛栓菌基因序列同源性达到了99%。[结论]通过RT-PCR得到了漆酶基因全长,重组毕赤酵母表达载体p9K+Lac的构建是完全正确的。

【关键词】 毛栓菌漆酶基因克隆表达载体构建
【基金】 黑龙江省自然科学基金项目(C200620);博士后研究人员落户黑龙江科研启动基金项目;哈尔滨科技局优秀学科带头人基金项目;黑龙江省财政厅科研基金项目
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2009年27期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.27.023
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】383
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