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蕺菜ISSR-PCR反应体系的建立及条件优化

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【作者】 黎晓英魏麟伍贤进饶力群

【Author】 LI Xiao-ying et al(College of Biological Sciences and Technology,Hunan Agricultural University,Changsha,Hunan 410128)

【机构】 湖南农业大学生物科学技术学院怀化学院生命科学系

【摘要】 [目的]针对蕺菜ISSR的反应特点,建立稳定可靠的ISSR分子指纹标记反应体系,为进一步研究蕺菜的居群遗传多样性奠定基础。[方法]通过筛选引物并设定影响蕺菜ISSR反应各因素的浓度,检测ISSR不同反应体系的扩增效果;通过分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立蕺菜ISSR稳定可靠的反应体系。[结果]建立了可用于蕺菜ISSR-PCR分析的最适宜反应体系。Taq酶质量、退火温度、Mg2+浓度、dNTP浓度均对ISSR反应结果具有较大影响。[结论]建立的蕺菜ISSR反应体系具有省时、经济、简便、扩增条带清晰而稳定以及重复性好等特点,可以较好地应用于蕺菜的居群鉴别及居群分子生态的研究。

【关键词】 蕺菜ISSR-PCR体系优化
【基金】 国家自然科学基金项目(30870230);湖南省自然科学基金(06JJ50059)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2009年28期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.28.090
  • 【分类号】S567.239
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】78
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