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黄瓜基因组DNA提取及AFLP体系优化研究

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【作者】 宋晓飞李晓丽冯志红闫立英

【Author】 SONG Xiao-fei et al (Hebei Normal University of Science and Technology,Changli,Hebei 066600)

【机构】 河北科技师范学院

【摘要】 [目的]提取黄瓜基因组DNA,并对AFLP体系进行优化。[方法]以黄瓜嫩叶为材料,利用改进的CTAB法提取高质量的黄瓜叶片总DNA,通过优化酶切连接、预扩增、选择性扩增等试验条件建立适合黄瓜的AFLP银染体系,得到清晰的黄瓜AFLP指纹图谱。[结果]DNA模板的质量影响酶切以及后续的连接扩增反应,改良的CTAB提取法可用于黄瓜AFLP分析,形成清晰的AFLP指纹。优化的酶切连接体系为:以37℃酶切连接12 h为宜,酶切连接的基因组DNA用量为200ng,预扩增时Taq酶用量为0.5U/20μl体系,预扩增产物稀释40倍作为选择性扩增的模板。在此优化的体系下引物E41M47扩增出清晰的条带。[结论]为黄瓜品种的分子标记和黄瓜品种间亲缘关系等研究奠定了基础。

【关键词】 黄瓜DNA提取AFLP反应体系
【基金】 河北省自然基金项目(C2007000725)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2009年29期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.29.106
  • 【分类号】S642.2
  • 【被引频次】10
  • 【下载频次】189
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