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Ⅰ型马立克氏病强弱毒株Meq基因的克隆与序列分析

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【作者】 丁维民王旋张训海魏建忠赵磊龚争谢海晶

【Author】 DING Wei-min et al (College of Animal Science and Technology,Anhui Agricultural University,Hefei,Anhui 230036)

【机构】 安徽农业大学动物科技学院家禽疫病防控监测安徽省重点实验室

【摘要】 [目的]为获得MDV-1强弱毒株Meq基因序列的差异。[方法]根据GENE BANK登录的马立克氏病毒Meq基因序列,设计一对引物,采用PCR技术对MDV-I型国内商用CVI988/Rispens疫苗株和参考强毒京-1(BJ-1)株的Meq基因进行了扩增,并将扩增产物提纯后克隆到pcDNA3.1(+)上,进行酶切鉴定及测序验证。[结果]CVI988疫苗株和BJ-1强毒株的Meq基因开放阅读框(ORF)长度分别为1200和1197bp。通过与国际标准强毒GA株Meq基因进行比较,BJ-1株和CVI988株Meq基因中分别有一段180和177bp的插入序列,第211位核苷酸由G变为T,导致第71位氨基酸由丙氨酸A变为丝氨酸S;同时,CVI988株Meq基因第228位核苷酸由A变为G,导致第77位氨基酸由赖氨酸K变为谷氨酸E。此外,与BJ-1株相比,CVI988株Meq基因在576~578bp之间缺失3个碱基(ACC),并导致第193位脯氨酸P的缺失,该突变发生在一个多脯氨酸重复区域内。[结论]MDV-1强弱毒株Meq基因序列存在明显差异,为从其分子水平进行区分及生物学功能的研究奠定了基础。

【关键词】 MDVMeq基因克隆序列分析
【基金】 农业科技成果转化资金项目(05EFN213400128);安徽省科技攻关项目(07010302148)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2009年30期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.30.138
  • 【分类号】S852.65
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】158
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