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一种适用于PCR的土壤微生物DNA的提取方法

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【作者】 李惠敏胡雪英秦新民

【Author】 LI Hui-min et al(College of Life Science,Guangxi Normal University,Guilin,Guangxi 541004)

【机构】 广西师范大学生命科学学院

【摘要】 [目的]对土壤微生物的DNA进行提取,以建立一种适用于PCR技术分析的土壤微生物DNA的快速提取方法。[方法]采用了2种不同的直接裂解法提取土壤微生物DNA,并用细菌通用引物27F和1492R进行PCR扩增16S rDNA片段。[结果]2种方法提取的土壤微生物总DNA电泳结果显示没有差别,但是只有CTAB、溶菌酶、冻融裂解法提取的总DNA不需要纯化,在增加Mg2+用量的条件下,只需用第一轮非特异PCR产物作为模板即可扩增出16S rDNA片段。[结论]CTAB、溶菌酶、冻融裂解法提取土壤DNA,方法操作简单、快捷,同时适用于PCR分析,为土壤微生物群落结构的多样性分析奠定了基础。

【关键词】 土壤微生物DNA提取PCR16SrDNA
【基金】 广西师范大学第三批青年骨干教师资助计划(2007)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2010年02期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.02.074
  • 【分类号】S154.34
  • 【被引频次】21
  • 【下载频次】1133
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