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栝楼的RAPD-PCR体系建立与优化

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【作者】 曲益涛董玲江芹宁志怨廖华俊

【Author】 QU Yi-tao et al (Anhui Agricultural University, Hefei, Anhui 230036)

【机构】 安徽农业大学园艺学院安徽省农业科学院

【摘要】 [目的]建立栝楼的RAPD-PCR体系并对该体系进行优化。[方法]以栝楼叶片为材料,采用CTAB法提取栝楼叶片基因组DNA,利用正交设计对RAPD-PCR体系进行优化。[结果]各因素水平变化对PCR反应影响大小依次为:Mg2+、TaqDNA聚合酶、引物和dNTPs。通过试验分析,优化的栝楼RAPD反应体系为:在25μl反应体系中,含10×buffer2.5μl,Mg2+2.0mmol/L,Taq酶1U,引物0.8μmol/L,dNTPs0.1mmol/L。反应程序为94℃预变性2mim;94℃变性30s,37℃退火温度40s,72℃延伸1.5mim,36次循环;72℃延伸10mim,4℃保存。[结论]该研究建立的栝楼RAPD反应体系稳定可靠,为栝楼性别鉴定、遗传多样性分析、亲缘关系分析等方面的研究提供了有效的方法。

【关键词】 栝楼RAPD分子标记优化
【所属期刊栏目】 经济作物与药用植物 (2010年13期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.13.091
  • 【分类号】S567.239
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】113
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