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大豆查尔酮异构酶基因的克隆及乳酸菌表达载体的构建

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【作者】 刘洪禹王丕武付永平张卓马超

【Author】 LIU Hong-yu et al(Biotechnological Center of Jilin Agricultural University,Changchun,Jinlin 130118)

【机构】 吉林农业大学生物技术中心

【摘要】 [目的]将特异存在于豆科植物的II型查尔酮异构酶基因CHI1A构建到目前最有效的食品级乳酸乳球菌NICE诱导表达系统中。[方法]利用RT-PCR技术从大豆总RNA中克隆CHI1A基因,连入pMD18-T克隆载体中并进行测序,然后重组到乳酸乳球菌表达载体PNZ8149-CHI1A,利用电穿孔方法转入乳酸乳球菌NZ3900中。[结果]克隆得到CHI1A完整开放阅读框670bp,与已报导序列(GenBankAY595413)的同源性达到99%;通过PCR和酶切鉴定,成功地将CHI1A导入到NICE表达系统中。[结论]含有CHI1A基因的乳酸乳球菌高效诱导表达载体的构建为利用微生物发酵产生类黄酮奠定基础。

【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2010年19期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.19.109
  • 【分类号】S565.1
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】253
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