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稻瘟病抗性基因Pi36原核表达载体构建·表达与鉴定

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【作者】 王玲张向明刘新琼

【Author】 WANG Ling et al(College of Resources and Environmental Sciences,South China Agricultural University,Guangzhou,Guangdong 510642)

【机构】 华南农业大学资源环境学院中南民族大学生命科学学院生物技术国家民委重点实验室

【摘要】 [目的]研究稻瘟病抗性基因Pi36的结构和功能。[方法]利用双酶切构建Pi36基因CC、NBS结构域的原核表达载体,通过菌落PCR鉴定和测序验证阳性克隆。然后分别收集不同浓度IPTG诱导,不同温度30和37℃分别培养的大肠杆菌细胞提取蛋白,利用SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的表达情况。[结果]当IPTG浓度为1mmol/L、30℃培养3h,目的蛋白表达量最大。[结论]为进一步研究稻瘟病抗性基因Pi36的抗病机理奠定基础。

【基金】 国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-023B);国家自然科学基金青年项目(30600400)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2010年21期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.21.115
  • 【分类号】S435.111.41
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】98
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