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功能性猪α干扰素基因的表达及活性检测

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【作者】 张蕾李鹏飞李伟伟马鸣潇

【Author】 ZHANG Lei et al(Biochemistry Department of Liaoning Medical University,Jinzhou,Liaoning 121000)

【机构】 辽宁医学院生化教研室

【摘要】 [目的]检测克隆猪α干扰素基因(IFN-α基因)在毕赤酵母中的表达。[方法]经植物血凝素(PHA)诱导后,提取猪外周血淋巴细胞,并用RT-PCR方法获得IFN-α基因,将该基因与真核表达质粒pPIC9K连接,并电转入毕赤酵母GS115菌中,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE电泳检测IFN-α蛋白表达,Western-blot分析IFN-α蛋白活性。[结果]重组转化菌株经甲醇诱导后能表达相对分子质量约为19kD的蛋白质,该蛋白质能与相应抗体产生免疫反应。[结论]实现了猪功能性IFN-α基因表在毕赤酵母中表达,为进一步探讨IFN-α的生物学活性研究奠定了基础。

【基金】 辽宁省科技厅博士启动资金(20081099);辽宁医学院博士启动资金资助
【所属期刊栏目】 动物与饲料科学 (2010年26期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.26.156
  • 【分类号】S852.5
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】83
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