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鸡MHC Ⅱ类分子部分基因的原核表达及单克隆抗体的制备与鉴定

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【作者】 叶平余为一

【Author】 YE Ping et al (Key Laboratory of Zoonoses of Anhui Province,Anhui Agricultural University,Hefei,Anhui 230036)

【机构】 安徽农业大学,安徽省人兽共患病重点实验室

【摘要】 [目的]制备鸡MHCⅡ类分子的单克隆抗体。[方法]在分析鸡MHCII类分子蛋白序列基础上,选取鸡MHCⅡα链基因第2~6外显子和β链基因第3~6外显子进行原核表达,以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经克隆和间接ELISA筛选阳性细胞株。[结果]共得到1株分泌鸡MHCⅡα链抗体和2株MHCⅡβ链抗体的杂交瘤细胞,分别命名为MHCⅡα-4、Ⅱβ6-2和Ⅱβ6-31,其腹水效价分别为1∶256000、1∶256000和1∶1280000。Western blotting分析表明其特异性强,能与相应蛋白结合。[结论]成功获得了3株稳定分泌抗鸡MHCⅡ类分子抗体的杂交瘤细胞。

【关键词】 鸡MHCⅡ类分子单克隆抗体鉴定
【基金】 国家自然科学基金(30671537)项目资助
【所属期刊栏目】 动物与饲料科学 (2010年28期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.28.145
  • 【分类号】S852.4
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】108
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