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两种来源的IBDV抗原制备单克隆抗体的比较

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【作者】 黄成斌潘玲余为一

【Author】 HUANG Cheng-bin et al (Key Laboratory of Zoonoses of Anhui Province,Anhui Agricultural University,Hefei,Anhui 230036)

【机构】 安徽省人兽共患病重点实验室,安徽农业大学

【摘要】 [目的]比较以原核表达蛋白与纯化病毒制备单克隆抗体的特性。[方法]RT-PCR扩增IBDVVP2基因,通过原核表达系统表达目的蛋白,并亲和纯化重组蛋白。尿囊液扩增IBDV,并通过超速离心纯化病毒。分别用纯化的重组VP2蛋白和IBDV免疫Balb/c小鼠,ELISA筛选杂交瘤细胞株。[结果]获得了2株分泌VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,腹水ELISA效价均为1∶2×104;4株分泌IBDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,腹水ELISA效价分别为1∶2×106,1∶6×104,1∶1×105,1∶4×103。所有单克隆抗体均与其制备用免疫原反应,不与空载体或其他病毒抗原反应。经10~20次传代,仍保持稳定的效价。[结论]纯化的原核表达VP2蛋白和IBDV均能诱导小鼠产生免疫应答;用原核表达的VP2蛋白作为免疫原,可以获得特异的VP2抗体。

【所属期刊栏目】 动物与饲料科学 (2010年28期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.28.148
  • 【分类号】S852.5
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】57
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