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玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因启动子的克隆与特异表达

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【作者】 徐亚维王丕武柴晓杰

【Author】 XU Ya-wei et al (College of Bioengineering,Jilin Agricultural Science and Technology University,Jilin,Jinlin 132101)

【机构】 吉林农业科技学院生物工程学院吉林农业大学农学院大连水产学院生命科学与技术学院

【摘要】 [目的]构建玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因种子特异表达启动子。[方法]LA-PCR扩增了玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因启动子序列,并克隆到pMD18-TVector上。再将启动子克隆到pBI121载体上,构建植物表达载体pBI121-sbeⅡb。把GUS基因连到pBI121-sbeⅡb上构建pSBE-GUS后利用农杆菌介导法转化烟草。分别进行PCR和Southern杂交检测,并对经基因枪轰击和农杆菌介导的烟草种子、根、茎及叶进行GUS组织化学分析和荧光检测。[结果]测序结果与GenBank中发表的玉米sbeⅡb基因启动子同源性达98.52%。共培养和筛选培养后获得4株转pSBE-GUS植株,叶片仅有少量蓝斑出现,而根和茎部未见蓝斑,但烟草种子有大量蓝斑显出,初步推断sbeⅡb基因启动子能启动GUS在种子中特异表达。[结论]成功构建了玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因种子特异表达启动子。

【关键词】 淀粉分支酶启动子扩增表达
【基金】 国家转基因植物中试与产业化基地建设专项基金项目(J99-13-001);吉林农业科技学院青年基金项目
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2010年36期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.36.088
  • 【分类号】S513
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】157
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