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绿色木霉非专一性产双功能酶的鉴定

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【作者】 刘萍顾雨辰刘靖夏文水

【Author】 LIU Ping et al (Institute of Food Science and Technology,Jiangsu Animal Husbandry and Veterinary Vocational College,Taizhou,Jiangsu 225300)

【机构】 江苏畜牧兽医职业技术学院食品科技学院江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室

【摘要】 [目的]对绿色木霉诱导产生的具有壳聚糖和纤维素降解活性的双功能酶组分CCBEⅡ进行酶学性质研究和酶类鉴定。[方法]采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定CCBEⅡ的壳聚糖酶和纤维素酶活力,对酶的温度、pH值稳定性、底物特异性、金属离子影响等酶学性质进行研究。[结果]双功能酶CCBEⅡ作用壳聚糖和羧甲基纤维素钠(CMC)的最适温度均为60℃,最适作用pH值分别为5.2和4.2。金属离子Mn2+、Mg2+对酶的2种活性都有激活作用,Fe3+、Cu2+、Ag+和Hg2+则能强烈抑制2种酶活。CCBEⅡ对CMC和壳聚糖(84%脱乙酰度)显示出相当的降解活力,而对对硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷无降解活性;以二糖方式切割CMC,而以单糖形式切割壳聚糖,可以水解GlcN-GlcN和GlcNAc-GlcN键或GlcN-GlcNAc键。经鉴定,CCBEⅡ与糖苷水解酶7族的绿色木霉所产的CBHⅠ(gi|295937)序列具有很高的同源性,二级结构以β-折叠为主。[结论]双功能酶CCBEⅡ与从商品纤维素酶制剂中纯化的双功能酶性质基本一致,两者为同一蛋白;经鉴定实际为具有外切壳聚糖酶活性的CBHⅠ,属于糖苷水解酶7族。

【关键词】 绿色木霉双功能酶纤维素酶壳聚糖酶CBHⅠ
【基金】 国家自然科学基金项目(NSFC,20876068);江苏省自然科学基金项目(BK2009734)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2010年36期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.36.033
  • 【分类号】TQ925
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】96
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