节点文献

SRAP分子标记用于苦荞分析中的条件优化

免费订阅

【作者】 夏楠王耀文韩瑞霞李艳琴王安虎蔡光泽

【Author】 XIA Nan et al (Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of the Ministry of Education,Institute of Biotechnology,Shanxi University,Taiyuan,Shanxi 030006)

【机构】 山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室西昌学院

【摘要】 [目的]研究SRAP分子标记用于苦荞分析中的条件优化。[方法]采用交互正交设计L27(313)对苦荞SRAP-PCR反应体系进行了5因素(Mg2+、dNTP、Taq酶、模板DNA和引物)3水平优化筛选,比较了非变性和变性PAGE检测方法,并进行了DYCZ-24F与DYCZ-20C2种电泳操作系统的对比试验。[结果]4个单因素(Mg2+、dNTP、Taq酶和引物)和2个交互作用(Mg2+×dNTP、Mg2+×Taq酶)对苦荞SRAP-PCR有极显著影响;最佳反应体系为:20μl总体积,Mg2+1.5mmol/L,dNTP0.2mmol/L,Taq酶1.5U,模板DNA40ng,引物0.25μmol/L,10×缓冲液2μl。运用该体系对7份苦荞材料进行扩增,扩增条带清晰、多态性高、重复性好。将扩增产物进行非变性与变性PAGE和2种电泳操作系统检测,结果显示非变性PAGE、DYCZ-24F操作系统更适合于SRAP的分析。[结论]为今后构建苦荞SRAP遗传图谱奠定了基础。

【关键词】 苦荞SRAP-PCR交互正交设计变性PAGE非变性PAGE
【基金】 国家自然科学基金项目(30771310)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2011年01期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.01.110
  • 【分类号】S517
  • 【被引频次】10
  • 【下载频次】189
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

浏览历史:
下载历史: