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华北落叶松AFLP反应体系的建立和优化

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【作者】 李晓楠狄晓艳王孟本

【Author】 LI Xiao-nan et al (Institute of Loess Plateau,Shanxi University,Taiyuan,Shanxi 030006)

【机构】 山西大学黄土高原研究所

【摘要】 [目的]建立和优化华北落叶松(Larixprincipis-rupprechtii Mayr.)的AFLP反应体系。[方法]以华北落叶松为材料,对其AFLP分析过程中的5个主要影响因素(酶切时间、内切酶用量、DNA模板用量、连接产物和预扩增产物稀释倍数)进行了研究。[结果]确立了适于华北落叶松AFLP分析的最佳反应体系,即在反应体积均为20.0μl的前提下,酶切时间为7 h(37℃3.5 h;65℃3.5 h),EcoRⅠ和MseⅠ内切酶用量均为1 U,DNA模板用量为3.0μl(50 ng/μl),连接产物稀释10倍取5.0μl用于预扩增,预扩增产物稀释70倍取4.0μl用于选择性扩增。[结论]采用该体系得到的电泳条带清晰可辨、多态性好、重复性强,可用于对华北落叶松遗传多样性和分子进化特征的深入研究。

【关键词】 华北落叶松AFLP反应体系建立优化
【基金】 山西省自然科学基金项目(2010011041-1)
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2011年02期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.02.136
  • 【分类号】S791.22
  • 【被引频次】9
  • 【下载频次】107
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