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副猪嗜血杆菌实时荧光PCR快速检测方法的建立和应用

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【作者】 李军谢宇舟禤雄标陈泽祥杨威马春霞胡帅彭昊许力干谢永平潘艳

【Author】 LI Jun et al(Guangxi Veterinary Research Institute,Nanning,Guangxi 530001)

【机构】 广西兽医研究所

【摘要】 [目的]建立一种快速准确定量检测副猪嗜血杆菌(HPS)的检测方法。[方法]根据GenBank公布的副猪嗜血杆菌16 S rRNA基因序列,选择其保守区域设计1对特异性引物。通过优化引物浓度和退火温度,建立快速定量检测副猪嗜血杆菌的实时荧光PCR方法,并评价了其特异性和稳定性。[结果]建立的实时荧光PCR方法最低检测限是50拷贝/μl,重复性好,变异系数均小于2%。该方法特异性强,只能检测副猪嗜血杆菌,不能检测到猪链球菌2型、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌DH5α和猪伤寒沙门氏菌。采用该方法对10份临床疑似HPS感染样本进行检测,其结果与细菌分离培养和常规PCR的结果一致。[结论]建立的实时荧光PCR方法快速、灵敏、特异、重复性高,可用于HPS感染的临床快速检测。

【关键词】 副猪嗜血杆菌实时荧光PCR16S rRNA
【基金】 广西科技攻关项目(桂科攻0993009-1)
【所属期刊栏目】 动物与饲料科学 (2011年06期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.06.213
  • 【分类号】S858.28
  • 【被引频次】14
  • 【下载频次】257
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