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反义托品酮还原酶Ⅱ基因对三分三的遗传转化及生物碱含量测定

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【作者】 彭静叶彭梅芳

【Author】 PENG Jing-ye et al(College of Life Science,Southwest University,Chongqing 400715)

【机构】 西南大学生命科学学院中国人民解放军成都军区总医院

【摘要】 [目的]通过反义托品酮还原酶Ⅱ基因提高托品酮还原酶I(TRI)的表达水平,从而增加莨菪碱在三分三中的含量,为大规模开发生产托品烷生物碱提供理论基础。[方法]将携带反义托品酮还原酶Ⅱ基因的重组工程菌C58C1-p1304+-antTRⅡ采用叶盘法对三分三进行遗传转化。潮霉素筛选转基因发根,PCR检测转基因发根基因组中是否同时含有rolB、rolC和Hygr抗性基因。PCR阳性转基因发根扩大培养后,提取生物碱,并采用高效液相色谱法进行生物碱含量测定。[结果]共有9个转基因发根的基因组同时检测到rolB、rolC和Hygr抗性基因,且这9个转基因发根中的莨菪碱含量较对照有不同程度的提高。[结论]反义托品酮还原酶II基因对托品烷生物碱代谢途径起到一定程度的正调控作用。

【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2011年12期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.12.338
  • 【分类号】S567.239
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】77
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