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基于Xcm I酶切的pUC19-T载体的构建

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【作者】 孙程龙李业伟王颖宫婷扈荣良

【Author】 SUN Cheng-long et al (College of Animal Science and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun, Jilin 130062)

【机构】 吉林大学畜牧兽医学院军事医学科学院军事兽医研究所吉林农业大学动物科技学院

【摘要】 [目的]构建以pUC19质粒为基础可利用XcmI内切酶制备的T载体。[方法]化学合成2条含有双XcmI酶切位点的互补寡聚核苷酸链,经过变性、复性后克隆入pUC19质粒的HindIII和BamHI位点之间,通过XcmI酶切后得到一个线性化的带有3’末端突出一个T碱基的T载体。[结果]经TA克隆验证,制备的pUC19-HB-T载体对PCR产物的克隆率达到95%以上。[结论]构建的pUC19-HB-T载体可用于PCR产物的克隆、测序及后续分子生物学操作。

【关键词】 T载体Xcm I限制性内切酶TA克隆
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2011年17期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.17.016
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】3
  • 【下载频次】539
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