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高效提取肠道菌群总DNA方法的建立

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【作者】 沈言虎张鹏丁铁林杨泉泉颜秉秉孙东旭

【Author】 SHEN Yan-hu et al(School of Life Science,Xuzhou Normal University,Xuzhou,Jiangsu 221116)

【机构】 徐州师范大学生命科学学院

【摘要】 [目的]建立一种高效快速的提取肠道菌群总DNA的方法,即改进的氯仿抽提法,为进一步对肠道菌群的定性和定量提供基础。[方法]通过对多种肠道菌群总DNA提取方法的考察总结,对氯仿抽提法进行改进,采用细菌添加试验的荧光实时PCR检测抽提结果,同时与QIAamp DNA Stool Mini kit法进行比较,以验证所建立的改进的氯仿抽提法的高效性。[结果]改进的氯仿抽提法提取的肠道菌群总DNA量约是QIAamp DNA Stool Mini kit的100倍;同时细菌添加试验的实时荧光定量PCR结果显示,改进的氯仿抽提法提取添加细菌的DNA效率较高。[结论]改进的氯仿抽提法经济、高效、快速,适合大批量的粪便样品的DNA提取。

【所属期刊栏目】 动物与饲料科学 (2011年18期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.18.133
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】471
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