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Lescpth5诱饵载体的构建及其自激活作用的检测

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【作者】 张月娟万一陈华民张琨赵廷昌

【Author】 ZHANG Yue-juan et al(Shaanxi Microbiology Institute,Xi’an,Shaanxi 710043)

【机构】 陕西省微生物研究所中国农业科学院植物保护研究所

【摘要】 [目的]构建诱饵载体pGBKT7-Lescpth5,并检测其转录自激活活性及对酵母细胞的毒性。[方法]采用PCR技术扩增Lescpth5基因,连接到诱饵载体pGBKT7上,转化重组载体于酵母感受态细胞AH109中,在营养缺陷型培养基上进行自激活检测和毒性检测。[结果]酶切和测序鉴定结果显示诱饵载体pGBKT7-Lescpth5构建成功,读码框正确。自激活检测结果和毒性检测结果显示诱饵载体对酵母菌株AH109没有转录激活活性,对酵母菌也无毒害作用。[结论]成功构建的诱饵载体可以用于酵母双杂交系统中,为下一步的cD-NA文库筛选奠定基础。

【基金】 北京市自然科学基金(6012017);新疆生产建设兵团博士资金资助
【所属期刊栏目】 农业灾害防御 (2011年19期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.19.183
  • 【分类号】S436.412
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】71
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