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1株抗鸡CD8α链单克隆抗体的鉴定

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【作者】 朱静文余为一

【Author】 ZHU Jing-wen et al(Key Laboratory for Zoonoses in Anhui Province,Anhui Agricultural University,Hefei,Anhui 230036)

【机构】 安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室

【摘要】 [目的]获得研究鸡CD8分子的单克隆抗体。[方法]用自行设计的引物PCR扩增鸡CD8分子α链部分基因片段,构建2个原核重组质粒,该片段经原核表达和纯化后免疫BALb/c小鼠,最后将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,细胞上清液用ELISA检测。[结果]PCR扩增获得大小约为510 bp的基因片段。构建的pET-32a-CD8α导入大肠杆菌,诱导表达获得了大小为39 kD的融合蛋白H is-CD8α。融合细胞经亚克隆,其上清液用ELISA检测和筛选,获得1株稳定传代和分泌抗CD8α的抗体的杂交瘤细胞株。该株细胞被命名为C11。上清液的ELISA抗体效价达1:600。[结论]该研究以原核表达的CD8α为抗原制备了1株单克隆抗体。

【关键词】 CD8α原核表达单克隆抗体
【基金】 国家自然基金项目(30671537)资助
【所属期刊栏目】 动物科学·饲料科学 (2011年20期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.20.235
  • 【分类号】S831;S852.4
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】35
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