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研究土壤微生物多样性的PCR条件优化

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【作者】 邸宁刘志民马焕普

【Author】 DI Ning et al(Agriculture University of Beijing,Beijing 102206)

【机构】 北京农学院

【摘要】 [目的]对PCR-DGGE法的试验条件进行优化,以更好地分析土壤微生物遗传多样性。[方法]改良高盐法提取土壤DNA,改进引物设计,改变PCR反应过程中退火温度、扩增体系,比较PCR扩增结果。[结果]经过改良的高盐法提取的土壤微生物DNA效果更好。PCR扩增选择20μl体系条带单一,易于操作。退火温度选择在55℃时无非特异性扩增,35个循环次数易于后续DGGE分析。[结论]已经优化的PCR基因扩增体系特异性高且稳定可靠。

【关键词】 PCR-DGGE土壤微生物多样性
【基金】 北京市教委资助项目(KM200910020001)
【所属期刊栏目】 土壤·肥料 (2011年23期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.23.011
  • 【分类号】S154.3
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】407
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