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马铃薯3种病毒的多重PCR检测方法构建

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【作者】 乔楠曹佳李霞

【Author】 QIAO Nan et al(Yulin academy,Yulin,Shaanxi 719000)

【机构】 榆林学院生命科学学院北京真思维生物科技有限公司陕西省榆林市农业科学研究所

【摘要】 [目的]构建马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)3种马铃薯主要易受感染的病毒多重PRC(multiplex PCR)检测方法。[方法]根据GenBank公布的PVA、TMV、PVY基因序列分别设计引物,建立3种马铃薯病毒的多重PCR方法;通过构建3种病毒PCR扩增目的基因的质粒用于制备标准品进行敏感性验证,利用PVX(Potato virus X)、PVM(Potato virus M)、PVS(Potato virus S)、PVV(Potato virus V),CMV(Cucumber mosaic virus)等其他马铃薯病毒进行特异性试验;并对11份疑似发生病毒病的马铃薯块茎采集样品进行了检测。[结果]研究中构建的马铃薯3种病毒多重PCR检测方法,最低检测下限:PVA为100 copies/2μl,PVY为100 copies/2μl,TMV为1 000 copies/2μl,与PVX、PVM、PVV、PVS、CMV等其他马铃薯病毒无交叉反应,具有良好的特异性;11份疑似发生病毒病的马铃薯块茎中7份样品检出3种病毒感染阳性。[结论]该研究成功构建了马铃薯PVA、TMV、PVY病毒的多重PCR方法,为马铃薯病毒检测技术应用奠定一定基础。

【关键词】 马铃薯PVATMVPVY多重PCR
【所属期刊栏目】 农业灾害防御 (2011年25期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.25.166
  • 【分类号】S435.32
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】264
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