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木聚糖酶基因xynA在大肠杆菌中的表达研究

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【作者】 殷尔康

【Author】 YIN Er-kang(Department of Food Science and Technology,Jiangsu Animal Husbandry & Veterinary College,Taizhou,Jiangsu 225300)

【机构】 江苏畜牧兽医职业技术学院食品科技系

【摘要】 通过引物拼接的方式合成采用大肠杆菌优势密码子的疏棉状嗜热丝孢菌木聚糖酶基因xynA,插入到热激质粒pHsh和质粒pET-20b中构建重组质粒pHsh-xynA和pET-20b-xynA,再转入大肠杆菌JM109表达。经热激和IPTG诱导后,木聚糖酶在重组菌中获得特异性表达,产物以胞内可溶性蛋白和包涵体形式存在。重组菌pET-20b-xynA在16℃下表达量最大,胞内酶活达42.13 U/ml,重组菌pHsh-xynA在42℃下胞内酶活最大,为35.06 U/ml。与质粒pHsh相比,pET-20b质粒更有利于重组木聚糖酶的表达。

【关键词】 木聚糖酶xynA基因大肠杆菌重组表达
【所属期刊栏目】 农业生物技术 (2011年32期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.32.016
  • 【分类号】Q78
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