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植原体免疫主导膜蛋白Imp基因在大肠杆菌中表达条件优化

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【作者】 柴化建赵海泉张丽君罗焕亮

【Author】 CHAI Hua-jian et al(Shenzhen Polytechnic,Shenzhen,Guangdong 518055)

【机构】 深圳市职业技术学院安徽农业大学生命科学学院深圳出入境检验检疫局

【摘要】 [目的]为提高植原体膜蛋白Imp基因在E.coli BL21(DE3)中的表达量,优化Imp基因的原核表达条件。[方法]通过设计正交试验,考察不同的培养条件对工程菌E.coli BL21(DE3)-pET-28a(+)-Imp的影响。在获得最佳培养条件的基础上考察不同诱导条件对Imp蛋白表达量的影响。利用SDS-PAGE和Gene Tools凝胶分析软件分析融合蛋白Imp的表达量。[结果]表达条件优化结果表明,最佳培养条件为:温度37℃,pH 7.0,装液量20%,振荡速度200 r/min;最佳诱导条件为:温度37℃,起始OD600≈1.5,IPTG终浓度0.1mmol/L,诱导培养时间6 h。[结论]在最佳条件下Imp表达量达70.98 mg/L,确定了Imp融合蛋白在大肠杆菌的优化表达条件。

【关键词】 植原体Imp基因表达条件正交试验设计
【基金】 深圳市科技计划项目(JC200903180710A)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2012年07期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.07.164
  • 【分类号】S432.4
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】119
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