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安徽农业科学. 2012年07期 第3901-3902+3905页
  • 记笔记

番茄黄化曲叶病毒CP基因的原核表达载体构建选择

乔宁李美芹刘永光王兴翠唐玉海魏家鹏

潍坊科技学院蔬菜花卉研究所

摘要:[目的]筛选出目的蛋白能够高效表达的重组质粒。[方法]利用原核表达载体pET-32a(+)和pET-28a(+)成功构建了番茄黄化曲叶病毒(Tomato Yellow Leaf Curl Virus,TYLCV)外壳蛋白(Coat Protein,CP)基因的重组质粒p32a-CP和p28a-CP,并通过PCR和双酶切鉴定了序列连接的正确性;再分别将2个载体转化至BL21(DE3)中,采用不同浓度的IPTG对其进行诱导表达,并进行SDS-PAGE电泳检测。[结果]测序结果显示TYLCV-CP基因已定向插入p32a-CP和p28a-CP中;SDS-PAGE电泳结果显示分子量约为50 kD的目的蛋白在重组载体p32a-CP中得到了高效表达,而在重组载体p28a-CP中未表达。[结论]为下一步的抗体制备及TYLCV的免疫学检测奠定了基础。
  • DOI:

    10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.07.165

  • 专辑:

    农业

  • 专题:

    植物保护; 园艺

  • 分类号:

    S436.412.11

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