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刚地弓形虫RH株SAG3蛋白抗体检测的ELISA方法建立

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【作者】 马亮任保彦左绍志宫鹏涛李建华张国才杨举张西臣

【Author】 MA Liang et al(College of Animal Science and Veterinary Medicine,Jilin University,Changchun,Jilin 130062)

【机构】 吉林大学畜牧兽医学院吉林省吉林市万达兽药经销公司

【摘要】 [目的]利用纯化的刚地弓形虫RH株表面蛋白SAG3的原核重组蛋白为基础,建立抗体间接ELISA检测方法。[方法]采用棋盘滴定法,确定间接ELISA的最佳条件。采用鼠抗新孢子虫阳性血清、鼠抗安氏隐孢子虫阳性血清、鼠抗柔嫩艾美尔球虫阳性血清、鼠抗蓝氏贾第虫阳性血清以及鼠抗微小隐孢子虫阳性血清和健康小鼠阴性血清作对照,检测血清之间是否有交叉反应。[结果]最佳包被条件为:抗原包被浓度0.25μg/孔,被检血清稀释度1∶400,酶标二抗稀释度1∶3 000,封闭剂5%脱脂奶粉的PBST溶液;血清之间没有交叉反应。该方法的灵敏度为1∶1 600。[结论]该方法灵敏度高,特异性较强,可重复性较好,可用于对弓形虫感染的检测及流行病学调查。

【关键词】 刚地弓形虫SAG3表面蛋白间接ELISA
【基金】 国家科技支撑计划课题(2008BAD96B11-3)
【所属期刊栏目】 动物科学·饲料科学 (2012年15期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.15.138
  • 【分类号】S852.7
  • 【被引频次】7
  • 【下载频次】109
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