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基因工程实验教学中PCR反应条件的正交优化

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【作者】 刘顺枝邓剑锋田长恩王小兰胡位荣

【Author】 LIU Shun-zhi et al(School of Life Sciences,Guangzhou University,Guangzhou,Guangdong 510006)

【机构】 广州大学生命科学学院

【摘要】 采用碱裂解法提取大肠杆菌的质粒DNA,检测提取到的DNA浓度和纯度,并以提取的DNA作为PCR反应体系中的模板,采用搜索性正交设计试验法探求PCR反应体系中4个因素(dNTPs、DNA模板、引物和Taq酶)在5个水平上的最适用量,在此基础上,进一步设计细调性正交试验筛选PCR反应的最适条件。结果表明,在20μl PCR反应体系中,DNA模板5 ng/μl,dNTPs 0.25 mmol/L,引物0.6μmol/L,Taq酶1.5 U/μl,Mg2+浓度1.5 mmol/L时,PCR的效果最好。

【基金】 广东省高等院校学科建设专项资金项目(2008-342);广州大学2012年度教育教学研究项目资助
【所属期刊栏目】 农业教育 (2012年24期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.24.015
  • 【分类号】Q78-4
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】183
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