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水稻线粒体基因atp6超表达载体的构建及遗传转化

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【作者】 熊磊谭艳平王春台刘学群

【Author】 XIONG Lei et al(Key Lab for Biotechnology of the State Ethnic Affairs Commission,College of Life Science,South Central University for Nationalities,Wuhan,Hubei 430074)

【机构】 中南民族大学生命科学院生物技术国家民委重点实验室

【摘要】 [目的]克隆水稻线粒体基因atp6,构建转基因表达载体,获得35S∷Rf1b5’∷atp6转基因水稻植株。[方法]设计目的基因的特异引物,采用TRIzol法提取水稻叶片总RNA,借助Toyobo反转录试剂盒反转录为cDNA,通过PCR扩增得到atp6全序列;将atp6连接到含线粒体信号肽(Rf1b5’)的pCAMBIA1302双元表达载体上,采用农杆菌介导的愈伤组织侵染法进行水稻的遗传转化。[结果]利用目的基因atp6成功构建了35S∷Rf1b5’∷atp6植物表达载体,并获得了转atp6基因的阳性植株。[结论]为探讨水稻中超表达atp6对水稻生长的影响奠定基础。

【关键词】 水稻atp6遗传转化
【基金】 国家自然科学基金项目(31170226和31170296)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2012年25期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.25.105
  • 【分类号】S511
  • 【下载频次】153
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