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抗菌肽SMAP-29基因密码子优化及其在毕赤酵母中的表达

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【作者】 任耀军何恩鹏王新华薄新文

【Author】 REN Yao-jun et al(Assets Department,Xinjiang Normal University,Urumchi,Xinjiang 830054)

【机构】 新疆师范大学资产管理处新疆师范大学运动人体科学重点实验室新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室

【摘要】 [目的]对抗菌肽SMAP-29的基因密码子进行优化,并使其在毕赤巴斯德酵母(Pichia pastoris)中表达。[方法]根据已知抗菌肽SMAP-29的氨基酸序列,参照毕赤巴斯德酵母密码子的偏好性,设计合成抗菌肽SMAP-29成熟肽基因片段,并同载体pPIC3.5K连接,电击转化至毕赤酵母受体菌GS115中,经G418筛选高拷贝转化子,并用MM、MD板和PCR法筛选Mut+表型。用甲醇诱导表达构建好的重组酵母表达基因工程菌,并裂解酵母细胞进行Tricine-SDS-PAGE分析。[结果]在诱导至第2天的细胞裂解液中检测到与预测的SMAP-29分子量相当,约为3.2 kD的表达带;表达产物对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌有明显的抑菌作用,而对大肠杆菌抑菌效果不明显。[结论]该研究为SMAP-29在生物医学、农业等领域中的应用奠定基础。

【关键词】 SMAP-29毕赤酵母胞内表达抑菌活性
【基金】 新疆兵团科技局基础研究项目(2006JC01);国家自然科学基金(31160218)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2012年25期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.25.001
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】130
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