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菜豆荚斑驳病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达

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【作者】 魏晓棠白桦尼秀媚张京宣宋涛

【Author】 WEI Xiao-tang et al(Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Qingdao,Shandong 266002)

【机构】 山东出入境检验检疫局青岛出入境检验检疫局

【摘要】 [目的]克隆菜豆荚斑驳病毒(BPMV)外壳蛋白(CP)基因,并对其进行原核表达。[方法]利用RT-PCR方法克隆BPMV CP基因,将其连接至pMD19-T Simple载体后对阳性克隆进行测序,检测其与已知病毒外壳蛋白基因序列的同源性;将CP基因定向插入双酶切的pET30a,构建其原核表达载体并转化大肠杆菌BL-21表达重组蛋白。[结果]试验克隆得到的CP基因大小为1 122 bp,与NCBI中目标基因的相似度达99%以上;试验成功构建了原核表达载体pET30a-BPMV CP,发现重组蛋白在37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导4 h条件下表达量最高。[结论]该研究为BPMV抗血清的制备与液相芯片检测方法的建立奠定了基础。

【关键词】 菜豆荚斑驳病毒外壳蛋白表达
【基金】 国家质检总局项目(2011IK170)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2013年05期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2013.05.109
  • 【分类号】S435.651
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】54
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