节点文献

MCL-1原核表达载体构建及重组蛋白表达

免费订阅

【作者】 余美华张姝芳倪晓敏袁进强胡巧玲万文彬杨仙玉

【Author】 YU Mei-hua;School of Animal Science and Technology,Zhejiang A&F University;

【机构】 浙江农林大学动物科技学院浙江农林大学林业与生物技术学院

【摘要】 [目的]构建日本蟾蜍(Bufo japonicus formosus)髓细胞白血病基因-1(myeloid cell leukemia-1,mcl-1)的原核表达载体并诱导其重组蛋白表达。[方法]通过PCR方法扩增日本蟾蜍皮肤mcl-1开放阅读框,将其插入到原核表达载体pET-28b中。经菌落PCR、DNA限制性内切酶消化筛选阳性克隆,并通过DNA测序确定原核表达载体pET-28b-mcl-1构建成功。将pET-28b-mcl-1转入大肠杆菌(E.coli)感受态细胞BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达,并用SDS-PAGE对重组蛋白的表达进行检测。[结果]原核表达载体pET-28b-mcl-1构建成功;重组蛋白在大肠杆菌中成功表达。[结论]原核表达载体的构建及重组蛋白的表达,为后续MCL-1的纯化、抗血清的制备及生理功能检测奠定了基础。

【关键词】 MCL-1原核表达载体重组蛋白表达
【基金】 国家自然基金项目(31071181);2011年度浙江省科技创新活动计划项目(2011R412042)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2013年18期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2013.18.005
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】167
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

浏览历史:
下载历史: