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辣椒SRAP-PCR反应体系优化及杂交群体多态性引物筛选

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【作者】 张佳琦吕庆芳董黎梨李映志叶春海

【Author】 ZHANG Jia-qi;LI Ying-zhi;YE Chun-hai;Guangdong Ocean University;

【机构】 广东海洋大学

【摘要】 [目的]对辣椒SRAP反应体系进行研究和优化,并利用优化体系对164对多态性引物进行筛选。[方法]采用单因素随机试验设计和L25(65)正交试验设计对辣椒SRAP反应体系中6种关键因素(退火温度、Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA)进行体系优化,并以"泡椒"×"青皮大椒"的亲本和F1代为材料,利用聚丙烯胺酰胺凝胶进行筛选。[结果]辣椒SRAP-PCR的最佳反应体系为:退火温度35.5℃,Taq DNA聚合酶1.0 U,模板DNA 2.25 ng/μl,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.4μmoL/L,Mg2+2 mmol/L,总体积为20μl。利用该体系,从164对SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富、条带稳定的31对引物组合。[结论]该体系的建立与多态性引物组合的筛选为SRAP标记技术在辣椒育种中的应用奠定了基础。

【基金】 科技部农业科技成果转化资金(2011GB2E000007);广东省重大科技专项(2004A20103001)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2014年07期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2014.07.078
  • 【分类号】S641.3
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】81
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