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拟南芥AtXCD1蛋白的原核表达研究

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【作者】 陈光朗董万春韩娇樊婷婷杨立波曹树青

【Author】 CHEN Guang-lang;CAO Shu-qing;School of Biotechnology and Food Engineering,Hefei University of Technology;

【机构】 合肥工业大学生物与食品工程学院

【摘要】 [目的]研究拟南芥AtXCD1蛋白的原核表达。[方法]构建XCD1原核表达载体,根据NCBI基因序列设计引物,并以PCR扩增得到大量目的片段XCD1,将XCD1连接到原核表达载体pET-32a+,并对重组质粒进行测序鉴定,将重组质粒转化至大肠杆菌原核表达菌株BL21(DE3),对蛋白表达条件:诱导时间、诱导温度和IPTG浓度等进行优化。IPTG诱导表达获得目的蛋白,对蛋白表达条件:诱导时间、诱导温度和IPTG浓度等进行优化。[结果]XCD1序列全长为1 242 bp,与PCR产物大小一致。蛋白XCD1-pET-32a+较适表达条件为在30℃0.1 mmol/L的IPTG诱导1.5 h。[结论]该结果为进一步蛋白纯化及酶活测定试验奠定了基础。

【基金】 安徽省青年科学基金项目(1308085QC56);高等学校博士学科点基金(20120111110009)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2014年14期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2014.14.006
  • 【分类号】Q943.2
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】38
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