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拟南芥bZIP23基因过量表达载体的构建及过表达植株的筛选

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【作者】 顾菊韩娇董万春阳立波曹树青

【Author】 GU Ju;CAO Shu-qing;School of Biotechnology and Food Engineering,Hefei University of Technology;

【机构】 合肥工业大学生物与食品工程学院

【摘要】 [目的]以拟南芥为材料克隆bZIP23基因,构建bZIP23基因的过量表达载体和筛选过表达植株,为验证其功能奠定基础。[方法]提取拟南芥总RNA和RT-PCR克隆bZIP23基因,用限制性内切酶切割和T4 DNA连接酶连接,使bZIP23基因连接到35S强启动子的pART27载体上;将连接产物转化到Trans1-T1感受态细胞中,筛选阳性单克隆进行菌落PCR鉴定并测序验证,获得重组质粒。将该重组质粒电激转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,浸花法转化拟南芥野生型植株。[结果]通过单菌落PCR鉴定和DNA测序结果显示,bZIP23基因与35S过量表达载体已连接,获得了重组载体;抗性筛选与遗传鉴定获得相应的转基因过量表达阳性植株。[结论]构建的过量表达载体及筛选得到的过量表达植株为验证bZIP23基因功能奠定了基础。

【基金】 高等学校博士学科点基金(20120111110009);安徽省青年科学基金资助项目(1308085QC56)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2014年14期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2014.14.007
  • 【分类号】Q943.2
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】299
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