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小牛肠碱性磷酸酶活性检测方法的建立

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【作者】 赖晓芳林霖李意刘奕雄兰全学赖心田杨国武

【Author】 LAI Xiao-fang;YANG Guo-wu;Shenzhen Academy of Metrology & Quality Inspection;

【机构】 深圳市计量质量检测研究院

【摘要】 [目的]建立适用于科研用小牛肠碱性磷酸酶活性的检测方法。[方法]通过模拟科研中小牛肠碱性磷酸酶的使用条件及缓冲液,并研究不同底物浓度、反应时间、显色时间、缓冲液pH等对酶活性检测的影响。[结果]使用不同缓冲液对酶活性进行检测,其测量值差异较大。若使用添加硼酸的铁氰化钾溶液,则可以实现颜色的稳定显示。最佳水浴时间为10 min,最佳底物浓度为0.04 mol/L。随着温度的增加,对低浓度酶活性的影响不大,但对高浓度酶活性的影响逐渐增大。当缓冲液pH为7.0~8.0时,能够较好维持酶活性的稳定性。缓冲液粒子强度对酶活性的影响不大。[结论]成功建立了科研用小牛肠碱性磷酸酶的活性检测方法。

【基金】 “十一五”国家科技支撑计划项目(2009BAK61B04)
【所属期刊栏目】 动物科学·饲料科学 (2014年18期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2014.18.003
  • 【分类号】Q55
  • 【下载频次】325
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