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水曲柳CBF1基因的克隆及表达分析

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【作者】 何之龙詹亚光曾凡锁

【Author】 HE Zhi-long;ZHAN Ya-guang;ZENG Fan-suo;Life Science College,Northeast Forestry University;National Key Laboratory of Forest Genetics and Breeding,Northeast Forestry University;

【机构】 东北林业大学生命科学学院东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室

【摘要】 [目的]探讨水曲柳CBF基因的表达及与生物钟调控的关系。[方法]利用c DNA末端快速克隆(RACE)技术克隆水曲柳CBF1基因的全长序列,并对三年生水曲柳幼苗叶片中Fm CBF1基因的时间表达特征进行初步研究。[结果]利用RNA末端快速扩增(RACE)的方法从水曲柳中克隆得到1个CBF基因家族成员Fm CBF1(Gen Bank:KJ541508.1),该基因ORF 669bp,推测编码蛋白质含有222个氨基酸残基,相对分子质量24.5 k D,理论等电点为5.11,在DNA序列内不含内含子。氨基酸序列同源性比较发现,水曲柳Fm CBF1基因与白桦Bp CBF1同源性最高,相似性达79.4%,在系统进化树中处于同一分支上。实时荧光定量PCR表达特性分析显示,Fm CBF1基因的表达具有一个大约以24 h为周期的节律性,最大值约出现在9:00,而夜间却处于较低的表达水平。在4℃低温处理1、3、6、12、24、72和120 h后Fm CBF1的qRT-PCR分析表明,该基因受到低温诱导,并在4℃条件下随低温时间的延长,该基因的诱导表达特性呈先升后降的趋势,最大值出现在12h时,达对照的25.5倍。[结论]为进一步研究水曲柳抗旱耐寒性及分子育种奠定基础。

【关键词】 水曲柳基因克隆CBF昼夜节律
【基金】 国家林业科技支撑项目(2011BAD02-1-3);国家自然科学基金项目(31270697)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2015年05期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.05.006
  • 【分类号】S792.41
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】123
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