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甜瓜CmERFIV-5基因cDNA的克隆·表达分析及载体构建

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【作者】 金乌云邵琪郝鑫鲍牧兰哈斯阿古拉

【Author】 JIN Wu-yun;SHAO Qi;HAO Xin;HASI Agula;College of Life Sciences,Inner Mongolia University;Inner Mongolia Key Laboratory of Herbage &Endemic Crop Biotechnology;

【机构】 内蒙古大学生命科学学院内蒙古自治区牧草与特色作物生物技术重点实验室

【摘要】 [目的]研究甜瓜Cm ERFIV-5基因的克隆、表达分析及超表达和RNAi载体构建。[方法]根据Gen Bank上登录的甜瓜一个乙烯应答因子(ethylene responsive facter,ERF)基因c DNA序列(登录号:MELO3C024315)设计合成特异性引物。应用RT-PCR技术从甜瓜品种河套蜜瓜(Cucumismelo L.cv.Hetao)成熟果实中克隆得到该基因c DNA序列,命名为Cm ERFIV-5,分析了该基因在甜瓜根、茎、叶及果实发育过程中的表达特性,将其构建到过量表达载体p PZP221中,得到重组植物表达载体p PZP221-Cm ERFIV-5。同时,构建了该基因RNAi载体p ART-27-Cm ERFIV-5。[结果]序列分析显示,所克隆的c DNA长度为808bp,编码255个氨基酸。荧光实时定量PCR分析表明,Cm ERFIV-5基因在甜瓜根、茎、叶及不同发育时期的果实中均有表达,在叶片中表达量最高。[结论]构建了Cm ERFIV-5基因的过量表达载体与RNAi载体,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

【关键词】 甜瓜乙烯应答因子乙烯表达CmERFIV-5
【基金】 国家自然科学基金项目(31360486)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2015年14期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.14.011
  • 【分类号】S652
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】134
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