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重组A型FMDV VP1基因乳酸杆菌穿梭表达质粒的构建及在大肠杆菌BL21中的表达

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【作者】 王淼周鹏潘丽张永光

【Author】 WANG Miao;ZHOU Peng;PAN Li;ZHANG Yong-guang;State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology,National Footand-Mouth Disease Reference Laboratory,Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences;

【机构】 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室

【摘要】 [目的]构建FMDV乳酸杆菌穿梭表达载体。[方法]从A型FMDV中克隆出VP1基因后,根据乳酸杆菌密码子偏好性对VP1进行优化,与表达载体p SIP411进行连接,并将连接产物转化到DH5α中筛选出阳性克隆菌,重组质粒酶切和PCR鉴定成功后再转化到BL21中,采用杆菌肽进行诱导表达。[结果]表达产物经SDS-PAGE和Western blottmy检测在24 k D处有明显的条带,证明VP1-p SIP411重组表达载体构建成功并在BL21中成功表达。[结论]为后续乳酸杆菌表达VP1蛋白研究奠定了基础。

【关键词】 口蹄疫病毒VP1pSIP乳酸菌大肠杆菌
【基金】 国家高技术研究发展计划(2011AA10A211);国家生猪产业体系项目(CARS-36-06B)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2015年21期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.21.010
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】179
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