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荧光定量PCR检测猪肝中猪链球菌2型的基因组DNA提取方法的比较

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【作者】 凌淑萍赵健陈国叶宇飞许秀琴吕燕吴银良

【Author】 LING Shu-ping;ZHAO Jian;CHEN Guo;Ningbo Academy of Agricultural Science;

【机构】 宁波市农业科学研究院

【摘要】 [目的]在人工布菌猪肝中评估溶菌酶-苯酚法和柱式纯化试剂盒法提取猪链球菌2型基因组DNA在荧光定量检测中的应用效果,为猪链球菌2型的荧光定量检测选择合理的基因组DNA提取方法提供试验依据。[方法]采用溶菌酶-苯酚法和柱式纯化试剂盒法分别提取人工布菌猪肝样本中猪链球菌2型基因组DNA,通过荧光定量PCR技术检测猪链球菌2型的相对含量。[结果]利用荧光定量方法能够检测到猪链球菌2型。该方法可以最低检测到12 CFU/g的猪链球菌,特异性良好,标准曲线方程为y=-3.185 9x+39.901 0。在人工布菌猪肝样本中,溶菌酶-苯酚法在q PCR实验中检测猪链球菌2型较灵敏。[结论]溶菌酶-苯酚法在猪肝样品中提取基因组DNA效果较好;试剂盒法在细菌纯培养物中提取基因组DNA具有安全、高效等优点。

【关键词】 猪链球菌2型基因组DNAqPCR检测
【基金】 宁波市农科教结合项目(2015NK24)
【所属期刊栏目】 生物技术 (2016年09期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.09.058
  • 【分类号】S852.61
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】117
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