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水环境中诺如病毒RT-LAMP快速检测方法的建立及应用

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【作者】 罗鸿斌

【Author】 LUO Hong-bin;Dongguan University of Technology;

【机构】 东莞理工学院

【摘要】 [目的]基于诺如病毒(NV)基因保守区,设计一套RT-LAMP简并引物,建立能简便、特异、灵敏检测水环境样品中NV的一步法RT-LAMP技术。[方法]通过试验,优化反应温度(64℃)、反应时间(40 min)、Mg2+浓度(2 mmol/L)等参数,建立反应体系。[结果]该方法只需1台水浴锅在1 h内即可完成检测,可直接用肉眼观察结果,检测灵敏度比普通RT-PCR高100倍;简并引物的设计增强了特异性,可检测多个血清型的NV。[结论]在样品检测中,RT-LAMP技术的灵敏度达97.7%,高于RT-PCR的90.7%,更适用于野外样品和简陋实验室的快捷检测。

【关键词】 诺如病毒逆转录环介导等温扩增
【基金】 广东省公益研究与能力建设专项资金项目(2014A020212692);东莞市高等院校、科研机构科技计划一般项目(2014106101006);广东高校省级重点平台和重大科研项目(2016GXJK156)
【所属期刊栏目】 资源·环境 (2017年15期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2017.15.020
  • 【分类号】R123
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】120
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