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莱茵衣藻MAPK4基因RNAi载体的构建及鉴定

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【作者】 王子贺邓晓东张阳费小雯

【Author】 WANG Zi-he;DENG Xiao-dong;ZHANG Yang;FEI Xiao-wen;College of Basic Medicine and Life Science,Hainan Medical College;Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences;

【机构】 海南医学院基础医学与生命科学学院中国热带农业科学院热带生物技术研究所

【摘要】 [目的]构建莱茵衣藻2A38的MAPK4基因的RNAi载体。[方法]提取莱茵衣藻细胞总RNA,利用PCR扩增出编码MAPK4的基因片段,用基因工程技术将MAPK4基因片段连接载体p MD18-T上,经过2次不同的双酶切后,与RNAi中间载体p T282连接,最后连接到干涉载体p Maa7IR/XIR上,用酶切及测序鉴定MAPK4基因RNAi载体并转化莱茵衣藻。[结果]经限制性内切酶酶切及测序鉴定,证实为重组质粒,并且该重组载体可在莱茵衣藻中表达。[结论]构建的MAPK4基因RNAi载体结构正确,为进一步利用RNAi技术使MAPK4基因沉默表达,研究MAPK4在莱茵衣藻中的生物学功能奠定了试验基础。

【关键词】 莱茵衣藻MAPK4基因RNAi
【所属期刊栏目】 生物技术 (2017年19期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2017.19.043
  • 【分类号】Q943.2
  • 【下载频次】116
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