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一个耐硒基因过表达载体的构建及转基因植株的筛选鉴定

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【作者】 钱靓雯欧阳剑孟云樊婷婷

【Author】 QIAN Liang-wen;OUYANG Jian;MENG Yun;School of Food Science and Engineering,Hefei University of Technology;

【通讯作者】 樊婷婷;

【机构】 合肥工业大学食品科学与工程学院

【摘要】 [目的]进一步验证WRKY47基因在调控硒胁迫应答中的功能,构建WRKY47过表达载体,获得相应的转基因株系。[方法]以野生型拟南芥的c DNA为模板,利用PCR扩增WRKY47基因全长,将该基因连接到p BI121载体上。将获得的重组载体转化至农杆菌菌株GV3101,通过浸化转化法将WRKY47重组质粒转化到拟南芥野生型植株中,利用转基因筛选与遗传鉴定获得WRKY47转基因阳性植株。[结果]扩增获得WRKY47基因,CDS全长1 470 bp,连接转化并获得测序正确的重组载体p BI121-WRKY47。通过抗性筛选和分子鉴定获得阳性转基因植株。[结论]成功构建过表达载体并获得相应的转基因株系,为进一步研究该基因的分子机制奠定基础。

【关键词】 拟南芥WRKY47基因过表达转基因植株
【所属期刊栏目】 动物科学·生物技术 (2018年20期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2018.20.025
  • 【分类号】Q943.2
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】166
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