节点文献

拟南芥SSP1基因GFP载体构建及GFP植株筛选

免费订阅

【作者】 吴席樊婷婷方雪徐洁娜曹树青

【Author】 WU Xi;FAN Ting-ting;FANG Xue;School of Food Science and Engineering,Hefei University of Technology;

【通讯作者】 曹树青;

【机构】 合肥工业大学食品科学与工程学院

【摘要】 [目的]以野生型拟南芥为材料构建SSP1基因GFP载体及GFP转基因植株。[方法]通过提取野生型拟南芥的RNA,反转录成为c DNA,并以c DNA为模板,利用高保真酶,进行SSP1基因的克隆,将克隆所获得SSP1基因和p XB94-GFP质粒进行双酶切,利用T4-DNA ligase进行连接,并转化进大肠杆菌DH5α感受态细胞中,通过菌落PCR和测序获得阳性单克隆。通过质粒抽提试剂盒提出构建好的重组质粒,并将其转入农杆菌GV3101中,通过菌落PCR鉴定出阳性单菌落。将获得的阳性菌通过花序浸染法转入野生型拟南芥中,并通过抗性筛选获得阳性植株。[结果]克隆SSP1基因成功,菌落PCR显示SSP1基因成功连接到p XB94-GFP质粒上并成功转入农杆菌中,抗性筛选获得了SSP1-GFP转基因植株。[结论]成功获得SSP1-GFP转基因植株,为接下来进一步研究SSP1基因功能奠定了基础。

【关键词】 拟南芥SSP1载体GFP转基因植株
【所属期刊栏目】 动物科学·生物技术 (2018年21期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2018.21.033
  • 【分类号】Q943.2
  • 【下载频次】268
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

浏览历史:
下载历史: