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以PMI为选择标记基因的雪柑遗传转化体系的优化

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【作者】 王会全吴少华余志雄

【Author】 WANG Hui-quan;WU Shao-hua;YU Zhi-xiong;Fujian Vocational College of Agriculture;Institute of Natural Products of Horticultural Plants,Fujian Agriculture and Forestry University;

【通讯作者】 余志雄;

【机构】 福建农业职业技术学院福建农林大学园艺植物天然产物研究所

【摘要】 [目的]以PMI为选择标记基因对雪柑的遗传转化体系进行优化。[方法]对农杆菌的菌液浓度、实生苗培养条件、甘露糖筛选压、2,4-D浓度、2,4-D预处理时间、农杆菌侵染时间、共培养时间进行梯度试验来研究转化后的再生率,并对筛选培养基中6-BA和NAA不同浓度组合进行试验来研究抗性大苗的筛选。[结果]经过暗培养20 d光培养10 d条件的实生苗外植体在农杆菌菌液OD600为0.6,1.0 mg/L 2,4-D预处理3 h,农杆菌侵染30 min,共培养时间4 d,筛选压为甘露糖20 g/L的情况下转化后的再生率大大提高,而在筛选培养基中加入2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA有助于抗性大苗的筛选。[结论]通过对影响转化的各种因素的优化试验建立了雪柑以PMI基因/甘露糖选择标记系统的高效遗传转化体系。

【基金】 福建省教育厅青年基金项目(JA12423);福建农业职业技术学院青年项目(2016JS0004)
【所属期刊栏目】 动物科学·生物技术 (2018年36期)
  • 【DOI】10.13989/j.cnki.0517-6611.2018.36.023
  • 【分类号】S666
  • 【下载频次】48
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