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拟南芥SPM12基因GFP载体构建及转基因植株筛选

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【作者】 方雪徐洁娜孟杏楠曹树青樊婷婷

【Author】 FANG Xue;XU Jie-na;MENG Xing-nan;School of Food Science and Engineering, Hefei University of Technology;

【通讯作者】 樊婷婷;

【机构】 合肥工业大学食品与生物工程学院

【摘要】 [目的]为了进一步研究SPM12基因的功能,利用哥伦比亚(Columbia,Col)遗传背景的野生型拟南芥材料构建SPM12基因GFP载体及其转基因植株。[方法]以野生型拟南芥的RNA反转录成的cDNA为模板,PCR扩增出SPM12基因的CDS全长序列,将其连接到GFP载体的质粒上;然后将构建成功的重组质粒转化到大肠杆菌DH5α受态细胞中,挑取阳性菌落经PCR鉴定并测序后,将其质粒转入农杆菌GV3101感受态细胞中。PCR鉴定出阳性菌落后,通过浸花法将其转入野生型拟南芥植株中。收种子后,使用带有抗性的选择性培养基筛选出阳性植株。[结果]通过SPM12基因CDS片段和SPM12-GFP重组质粒的获得,构建了SPM12-GFP载体和其转基因植株。[结论]成功获得拟南芥SPM12-GFP转基因植株,为进一步研究拟南芥SPM12基因的功能与分子机制奠定了基础。

【关键词】 拟南芥SPM12载体GFP转基因植株
【基金】 中央高校基本科研业务费专项资金项目(JZ2018HGTB0248)
【所属期刊栏目】 动物科学·生物技术 (2019年02期)
  • 【分类号】Q943.2
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】207
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