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慢病毒介导PNX沉默细胞株的构建与鉴定

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【作者】 丁毅飞曹春雨王凭青

【Author】 DING Yi-fei;CAO Chun-yu;WANG Ping-qing;Bioengineering Institute of Chongqing University;

【通讯作者】 王凭青;

【机构】 重庆大学生物工程学院

【摘要】 [目的]构建慢病毒介导的PNX沉默载体,感染GnRH分泌细胞(GT1-7)后进行筛选鉴定,获得稳定的PNX沉默细胞株。[方法]结合RNAi干扰技术构建出慢病毒沉默载体,在293T细胞中包装病毒并测定滴度。感染GnRH分泌细胞(GT1-7),嘌呤霉素筛选得到稳定细胞后利用Real-time PCR和Western blot检测PNX沉默效果。[结果]慢病毒介导的PNX沉默载体构建成功,包装的慢病毒成功感染GT1-7细胞,并且Real-time PCR和Western blot证实了PNX沉默细胞株的PNX沉默效果。[结论]成功构建了慢病毒介导的PNX沉默细胞株,为以后探索PNX对动物生殖发育的作用打下了基础。

【关键词】 慢病毒PNX生殖
【基金】 国家自然科学基金面上项目(31372287)
【所属期刊栏目】 动物科学·生物技术 (2019年02期)
  • 【分类号】Q78
  • 【下载频次】42
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