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拟南芥MDH2基因GFP载体构建及转基因植株的筛选鉴定

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【作者】 王媛媛韩洋洋耿庆鎏朱香豫曹树青樊婷婷

【Author】 WANG Yuan-yuan;HAN Yang-yang;GENG Qing-liu;School of Food and Biological Engineering,Hefei University of Technology;

【通讯作者】 樊婷婷;

【机构】 合肥工业大学食品与生物工程学院

【摘要】 [目的]以野生型拟南芥为材料构建MDH2基因GFP载体及GFP转基因植株,研究MDH2基因在植物响应镉胁迫机制中的功能。[方法]通过提取野生型拟南芥的RNA,反转录成为cDNA,并以cDNA为模板,利用PCR扩增MDH2基因,将扩增所获得MDH2基因和pXB94-GFP质粒双酶切后连接,并转化进大肠杆菌感受态细胞中,鉴定正确后再转入农杆菌感受态细胞中,通过菌落PCR鉴定出阳性单菌落。再通过浸花法转入野生型拟南芥中,最后利用抗性筛选和PCR鉴定获得MDH2转基因阳性植株。[结果]成功克隆MDH2基因,并构建了MDH2-GFP重组质粒,抗性筛选获得了MDH2-GFP转基因植株。[结论]成功获得MDH2-GFP转基因植株,为进一步研究该基因在植物响应镉胁迫机制中的功能奠定了基础。

【关键词】 拟南芥MDH2载体转基因植株
【基金】 中央高校基本科研业务费专项资金资助(JZ2018HGTB0248)
【所属期刊栏目】 动物科学·生物技术 (2019年02期)
  • 【分类号】Q943.2
  • 【下载频次】405
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