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半巢式RT-Realtime PCR方法检测藜草花叶病毒

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【作者】 贺丽娜李金庆厉艳粟智平封立平鲁闽段效辉王颖刘宁

【Author】 HE Li-na;LI Jin-qing;LI Yan;Penglai Inspection and Quarantine Integrated Technical Service Center;Inspection and Quarantine Technology Center of Yantai Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau;Shandong Inspection and Quarantine Technology Center;

【通讯作者】 李金庆;

【机构】 蓬莱检验检疫综合技术服务中心烟台出入境检验检疫局检验检疫技术中心山东检验检疫技术中心

【摘要】 [目的]根据藜草花叶病毒(SoMV)全基因组中多聚蛋白质基因序列保守区,分别设计2套TaqMAN探针和引物,建立半巢式实时荧光PCR检测SoMV的新方法。[方法]提取病毒核酸进行反转录操作合成cDNA,依据设计好的2套TaqMAN探针和引物,分别进行实时荧光PCR特异性与灵敏度检测,并进行2套引物探针的扩增效率对比试验。[结果]方法特异性强,灵敏度高达0.4 fg/μL植物总RNA,2套引物探针的扩增效率试验对比结果显示扩增效率几乎完全一样。[结论]该方法适用于藜草花叶病毒的检疫鉴定。

【基金】 国家质量基础的共性技术研究与应用(NQI)重点专项项目(2017YFF0211103);山东出入境检验检疫局科技项目(SK201628,SK201754);烟台市科技发展计划项目(2008324);质检总局科技项目(2016IK312,2016IK313,2015IK200)
【所属期刊栏目】 贮运加工·检测分析 (2019年02期)
  • 【分类号】S41-30
  • 【下载频次】71
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