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摘要:针对鸽肠杆菌的传统检测方法检测周期长的问题,笔者建立了快速检测鸽肠杆菌的环介导等温扩增(LAMP)法。笔者以肠杆菌属毒力标志基因(iss基因)的保守区域设计4条特异性LAMP引物,分别进行了反应条件的优化、灵敏度试验、特异性试验、限制性内切酶试验。结果显示,其最优的体系中甜菜碱浓度为1.6 mol/L,Mg SO4浓度为2.5 mmol/L,内外引物浓度比FIP∶BIP∶F3∶B3=3∶3∶1∶1。将所有反应混合物置于63℃恒温反应40 min就能完成对iss基因的扩增,肉眼可观察检验结果。该方法具有良好的特异性,灵敏度是PCR的1000倍。这是一种快速、特异、灵敏的肠杆菌属iss基因LAMP检测方法,其适用于基层和现场检测。
  • 专辑:

    农业科技; 基础科学

  • 专题:

    生物学; 畜牧与动物医学

  • 分类号:

    S852.61

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